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用于碳青黴烯類耐藥菌(KPC)的檢測
組 分
科玛嘉尿路菌群顯色培養基和KPC增補劑各一瓶。
基礎培養基:瓊脂 15.0 g/L 蛋白胨和酵母粉 17.0 g/L 色素1.0 g/L
增 補 劑:0.4 g/L pH值 7.0
操作
1、法國科瑪嘉KPC顯色培養基基礎培養基:取瓶內幹粉33.0g溶于1000mL去離子水的潔淨三角瓶中,充分攪拌混勻。也可根據需要按照33.0 g/L的比例擴大或縮小制備培養基的量。
2、加熱至100℃,不停攪拌,使其完全溶解。若使用微波爐加熱,應將培養基加熱沸騰,立即移出,輕輕搖勻,再放入微波爐加熱,觀察小氣泡變爲大氣泡,直至完全溶解即可。切勿使培養基溢出。將溶解好的培養基高壓滅菌(121℃,15min)。
3、增補劑:取增補剂0.4g溶于10ml無菌去離子水中,攪拌均勻,也可根據需要按照0.4 g/L的比例扩大或缩小制备增補剂的量。注:搅拌成淡黄色的不透明匀质溶液可能需要几分钟,配制好的增補剂溶液必须在当天用完,禁止保存和重复使用。
4、将溶解完全的增補剂加入到冷却至45℃~50℃的科玛嘉尿道菌群定位顯色培養基中,轻轻地摇动均匀,配制成科玛嘉KPC顯色培養基,倾注平皿,使其凝固,晾干备用。
保存 該成品平板在室溫可保存一天或在冰箱內貯存2個月(2℃~8℃,避光)。
接種
划线或涂布接種(冰箱内保存的平板使用前应恢复至室温),在36
結果
微生物(Microorganism) | 菌落顔色 |
耐碳青黴烯類大腸杆菌(CarbapenemR E.coli ) | 深粉至紅色 |
耐碳青黴烯類克雷伯氏菌、腸杆菌、檸檬酸杆菌CarbapenemR KEC (Klebsiella, Enterobacter, Citrobacter) | 金屬藍色 |
耐碳青黴烯類假單胞菌(CarbapenemR Pseudomonas) | 半透明狀,綠色素沈澱 |
耐碳青黴烯類不動杆菌(CarbapenemR Acinetobacter) | 奶油狀 |
寡養單胞菌(Stenotrophomonas) | 無色 |
革蘭氏陽性菌Gram(+) strains | 抑制 |
碳青黴烯類菌株(CarbapenemS strains) | 抑制 |
酵母菌(Yeasts) | 大部分抑制 |
性能及局限
最终鉴定需要補充做生化试验或免疫学试验。
貯存條件
幹粉需保存于15℃~30℃干燥环境中,增補剂需保存于2℃~8℃環境中,在有效期前使用。